TÉCNICA DE PCR PARA DETECTAR EL VIRUS DEL PAPILOMA HUMANO EN BIOPSIAS DE CÁNCER DE MAMA

TEMA: Detección del virus del papiloma humano en biopsias de cáncer de mama mediante PCR e inmunohistoquímica en el Hospital Santa Rosa durante el 2019.

OBJETIVO: Determinar la presencia del Virus Papiloma Humano (VPH) tipo 16 y 18 en biopsias de tejido mamario parafinado de pacientes con diagnóstico clínico de cáncer de mama.

TIPO DE MUESTRA BIOLÓGICA: Biopsias de tejido mamario parafinado. 

TIPO DE ÁCIDO NUCLÉICO A SER EXTRAÍDO: ADN viral. 

EXTRACCIÓN (LISIS, SEPARACIÓN, PURIFICACIÓN): Se utilizó el kit NucleoSpin ® DNA FFPE XS, siguiendo las indicaciones del fabricante. Se midió la concentración y calidad del ADN con un espectrofotómetro marca DeNovix, modelo DS-11FX+, se utilizó 2uL por muestra y se procedió a las lecturas en 260 NM y relación A260 / A280, respectivamente.

GEN O SECUENCIA A AMPLIFICAR: Gen E6 del HPV-16 y HPV-18.

TAMAÑO EN PARES DE BASES: Oligonucleótidos para HPV-16 --> 128 bp

                                                           Oligonucleótidos para HPV-18 --> 124 bp

                                                            Oncogen E6 ----> 450 bp

TIPO DE PCR: qPCR

PASOS:

DESNATURALIZACIÓN: 94°C ----- 5 segundos

HIBRIDACIÓN:                 50°C ------ 20 segundos

ELONGACIÓN:                 60°C ------- 40 segundos

VISUALIZACIÓN: 

REFERENCIA:

Zapana Enrique Mamani-, Vilcapoma-Diaz Meyling, Ortiz-Muchotrigo Nazario. Deteccion del virus del papiloma humano en biopsias de cancer de mama mediante PCR e inmunohistoquimica en el Hospital Santa Rosa durante el 2019. Rev. perú. med. exp. salud publica  [Internet]. 2022  Oct [citado  2023  Dic  17] ;  39( 4 ): 450-455. Disponible en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1726-46342022000400450&lng=es.  Epub 15-Dic-2022.  http://dx.doi.org/10.17843/rpmesp.2022.394.11069.